Como funciona o curso
O Curso de PCR Quantitativo em Tempo Real terá uma abordagem teórica e prática onde todos os participantes terão a oportunidade de aprender a técnica executando o experimento pessoalmente.
O curso irá abordar desde o planejamento experimental, passando pelapipetagem dos reagentes de RT-qPCR,montagem do programado termociclador, até a obtenção e análise básica dos dados.
Os participantes receberão um material didático contendo informações sobre a fundamentação teórica da técnica de PCR Quantitativo em Tempo Real, bem como os procedimentos que devem ser seguidos para a execução prática dos experimentos.
A parte prática do curso ocorrerá com as seguintes etapas:
Primeira etapa: Desenho de primers
Nessa etapa os participantes irão aprender como acessar o maior banco de dados de nucleotídeos do mundo para realizar a busca de um gene alvo de interesse. Posteriormente, os participantes aprenderão quais as principais características que devem ser levadas em conta para o desenho de primers utilizando o software em plataforma online.
Segunda etapa: Programação dos experimentos no software
Os alunos irão conhecer o software que controla o termociclador em PCR em tempo Real, para que aprendam a programar os principais tipos de delineamentosexperimentaisutilizando essa técnica, como a quantificação absoluta e relativa.
Terceira etapa: Teste da concentração de primers
Com os primersem mãos, os participantes terão o primeiro contato com os reagentes e materiais utilizados para a realização do primeiro experimento de RT-qPCR.
Neste momento os alunos irão realizar o teste da concentração de primers, cujo resultado irá nos dizer qual a concentração mais adequada para cada primer utilizado.
Quarta etapa: Teste da eficiência da reação
O teste da eficiência da reação é um passo primordial dos experimentos de RT-qPCR. Nesta etapa os alunos irão montar, com constante orientação dos professores, um ensaio fundamental para a continuidade dos experimentos e para a obtenção correta dos resultados finais precisos.
Quinta etapa: Quantificação Absoluta e Relativa
Nessa etapa, será realizada a montagem de uma placa de PCR em tempo real para a realização de dois tipos de experimentos: A Quantificação Absolutae a Quantificação Relativa.Serão abordadas as diferenças entre os dois tipos de experimento e aplicabilidade de cada um deles de acordo com o tipo de ensaio a ser realizado.
Sexta etapa: Análise de Dados
Por fim, os participantes terão a oportunidade de aprender como analisar os dados no software de RT-qPCR e de como exportar os dados para a realização da análise dos dados em outros softwares. Serão avaliados erros de execução dos ensaios, possíveis problemas e suas soluções.
Ao término dos cursos, é realizada a entrega dos certificados de conclusão com sua respectiva carga horária.
Com toda esta abordagem teórica e prática, os alunos terão a oportunidade de adquirir os conhecimentos necessários para a aprendizagem e realização de seus trabalhos.